易水寒 发表于 2013-5-17 10:01:19

引物设计时总是发生严重错配怎么办?

要设计一对Real-Time PCR(染料法)的引物,但是由于目的序列自身碱基重复较多,设计引物时经常发生错配,软件(PrimerPremier5)给出的100对引物都有错配,最好的情况也是其中一条正向引物或反向引物有错配。请教一下这种情况下应该怎么设计引物?
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