以NADH为底物的酶的酶活怎么测定？

NADH在340nm处有吸光值，利用的酶能氧化NADH成NAD+，所以在测定该酶的酶活时，是利用其在340nm处吸光值的减小来算的，另外使用的是752型分光光度计，在测定中有几个疑问：1、吸光值降低到负值，对酶活的测定影响大吗？2、在测定中每次吸光值都是降到-0.097，而且在加入一个物质时，酶活降低了将近50%，吸光值还是降到-0.097，这是什么原因呢？3、在后面的实验中，又发现的是：空白对照后，在放入样品前，发现其吸光值也是-0.097，那么对“2”能给出的是什么结论呢？