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唐正生
发表于 2013-5-7 17:47:08
用两个DNA片段进行连接,产物用酶切开,大小为什么变了?
两个片段均是用NEB的BsaI内切酶消化得到,不过对于两个的末端是否是匹配,目前尚不清楚,正准备送测序。不管两个末端是否匹配,连接后的产物是能通过抗生素筛选的。将连接产物提取质粒后,再用BsaI进行酶切,大小却变了。连接的大片段是3kb,小片段是900bp,连接后,提取质粒,再消化,大片段变成了2kb左右,小片段的大小倒是没有变化。费解的就是为什么连接后再酶切,片段的大小竟然变了。
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用两个DNA片段进行连接,产物用酶切开,大小为什么变了?