本人做菊花的遗传转化,所用菌种为EHA105,摇菌过程为:挑单菌落于5ml LB液体培养基中(含50Km+100Lif),过夜培养,然后从中取1ml菌液,转入50mlLB液体培养基中(不含抗生素)。在此过程中,菌液都可见明显变混。待菌液OD600=0.4-0.7时应用侵染转化。共培养培养基为不含任何抗生素的分化培养基。不知道为什么,一般共培养两天后都可在叶盘边缘看见明显的共杆菌菌落,而这次共培养4天,都看不见菌落,一般最多4天后,就会将叶盘转入富含200cef或者100cef的延迟培养基中。此后的过程中也没有菌落出现。不知是中间什么步奏做错了么,还是跟所用菌种和植物材料有关? |
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共 0 个关于本帖的回复 最后回复于 2013-4-26 14:20